急性甲醇中毒事件卫生应急处置技术方案

附件1

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变色酸比色法半定量、定量检测白酒中的甲醇

1 适用范围

适用于80度以下蒸馏酒或配制酒中甲醇的测定。测定结果可作为初步判断事件性质的重要参考，不能作为确定事件性质的依据。重大突发事件性质的判定，建议采用气相色谱方法加以确认。

2 原理

甲醇在酸性条件下被高锰酸钾氧化成甲醛。甲醛与变色酸在硫酸溶液中发生反应，生成紫红色物质，显色深浅与甲醇含量成正比。与标准色阶目视比较半定量测定或于波长540nm处比色定量测定。

3 方法重要参数

3.1 检测范围：（0.00～0.12）g/100ml。

3.2 检测限：目视法：0.02g/l00ml。

分光光度法：0.004g/l00ml。

3.3 精密度（RSD）：≤10%。

3.4 准确度(回收率)：94%～105%。

3.5 全程测定时间：40min。

3.6 干扰：酒精度对反应有干扰，酒样需稀释到乙醇含量为6%左右方可消除干扰；酒中含有的甲醛会增加光密度，经过稀释不会影响测定结果。

4 仪器

  分光光度计; 25ml具塞比色管；水浴锅。

5 试剂

5.1 试剂(除甲醇为色谱纯外，其余均为分析纯)。

5.2 固体高锰酸钾、亚硫酸钠、变色酸。

5.3 磷酸溶液(1+5)。

5.4 硫酸溶液(4+1)。

5.5 无甲醇乙醇溶液:6％。

5.6 甲醇标准使用液：0.2g／L。

5.7 现配试剂

a) 高锰酸钾磷酸溶液：每测定管加约15mg高锰酸钾和0.5ml(1+5)磷酸溶液配成。按测定总用量一次配制。

b) 变色酸溶液:每管加约lOmg变色酸和一滴重蒸水配成。按测定总用量一次配制。

6 设备

吸管、比色管、分光光度计、酒精比重计、温度计、量筒、水浴锅。

7 操作步骤

7.1 酒样稀释

根据实测到的乙醇浓度按下式计算取样体积：

V = 5×6／酒样酒精度

V—取样体积(ml)；

5—酒样稀释液体积(ml)；

6—酒样稀释成的乙醇浓度(％)。

取酒样Vml用重蒸水稀释定容到5ml，待测。

7.2 测定

7.2.1制作标准曲线：取5支5ml具塞比色管，分别加入6％无甲醇乙醇溶液0.50ml、0.45ml、0.40ml、0.30ml、0.20ml。然后加入甲醇标准使用液0.00ml、0.05ml、0.10ml、0.20ml、0.30ml。(相当于换算成60度酒时甲醇浓度0.00g/100ml、0.02g/100ml、0.04g/100ml、0.08g/100ml、0.12g/100ml)。各管加入现配的高锰酸钾磷酸溶液0.50ml,加盖室温放置10min后，各管分次加入少量亚硫酸钠，直至溶液褪色。褪色后，加一滴变色酸溶液，沿壁缓慢加3.0ml(4+1)硫酸溶液。盖塞后,轻轻颠倒数次于70℃～80℃水浴加热10min，取出冷至室温。

7.2.2样品测定：另取2支5ml具塞比色管,各加入稀释后的酒样0.50ml,测定方法同标准曲线。

a) 目视比色法：将样品管与标准系列进行目视比色。

b) 分光光度法：用零管调零，于540nm波长处测定吸光度值，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准工作曲线。从工作曲线查出样品中甲醇含量。

计算公式：
 

X—折成60度酒时的甲醇含量，g／100ml；

A—测定样品中甲醇含量，mg；

v—酒样取样量，ml；

5—酒样稀释液体积，ml；

0.5—酒样稀释液取量，ml。